Ano ang layunin ng pangunahing antibody sa isang Western blot?
Ano ang layunin ng pangunahing antibody sa isang Western blot?

Video: Ano ang layunin ng pangunahing antibody sa isang Western blot?

Video: Ano ang layunin ng pangunahing antibody sa isang Western blot?
Video: Kung Umiinom ng Losartan, Panoorin Ito - Payo ni Doc Willie Ong #1419 - YouTube 2024, Setyembre
Anonim

Gamit ang direktang paraan ng pagtuklas, isang enzyme- o fluorophore-conjugated pangunahing antibody ay ginagamit upang makita ang antigen ng interes sa blot . Sa hindi direktang paraan ng pagtuklas, isang walang label pangunahing antibody ay unang ginamit upang itali sa antigen.

Bukod dito, ano ang pangunahing antibody sa Western blot?

Ang pangunahing antibody kinikilala at tinatali ang epitope o ang tukoy na pagkakasunud-sunod ng amino-acid ng protina ng interes. Pangalawa mga antibodies ginagamit para sa bahid ng mga kanluranin ay karaniwang sinamahan ng isang enzyme; ang pinakakaraniwang ginagamit na mga enzyme ay Horse Radish Peroxidase (HRP) at Alkaline Phosphatase (AP).

Bilang karagdagan, ano ang ginagawa ng pangunahing antibody? Pangunahing mga antibodies ay immunoglobulins na nagbubuklod sa isang tukoy na antigen ( protina , peptide, maliit na molekula, atbp.) ng interes at karaniwang hindi pinagsasama-sama. Ang isang mahusay na pangunahing antibody ay kinikilala at nagbubuklod na may mataas na pagkakaugnay at pagiging tiyak upang linisin, makita, at sukatin ang antigen.

Dahil dito, ano ang layunin ng isang Western blot?

A western blot ay isang pamamaraang laboratoryo na ginagamit upang makita ang mga tiyak na mga molekulang protina mula sa isang pinaghalong mga protina. Susunod, ang mga molekulang protina ay pinaghiwalay ayon sa kanilang laki gamit ang isang pamamaraan na tinatawag na gel electrophoresis. Kasunod ng paghihiwalay, ang mga protina ay inililipat mula sa gel papunta sa a pag-blotter lamad.

Paano ginagamit ang mga antibodies sa Western blotting?

Mga Antibodies ay ginamit na upang makita ang mga target na protina sa western blot (immunoblot). Ang mga antibodies ay sinamahan ng mga fluorescent o radioactive na label o mga enzyme na nagbibigay ng kasunod na reaksyon ng isang inilapat na reagent, na humahantong sa isang pangkulay o paglabas ng ilaw, na nagbibigay-daan sa pagtuklas.

Inirerekumendang: